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本文標題:"熒光光度分析儀器檢測水中含浮游植物的步驟"

發(fā)布者:yiyi ------ 分類: 行業(yè)動態(tài) ------ 人瀏覽過-----時間:2013-7-24 10:18:11

熒光光度分析儀器檢測水中含浮游植物的步驟

熒光光度分析法
(In Vitro Determination of Chlorophyll a and Pheophytin a in M??arine and Freshwater Algae by Fluresence)步驟為:
首先先確定所有采樣器具需無殘留酸化的物質(zhì),取定量的水樣體積(依水樣的顆粒多寡而定,
過濾后濾??紙需呈現(xiàn)淡綠或褐色(外海常需過濾達四公升水樣,因浮游植物較稀少;
內(nèi)陸或湖泊則可降低至一公升以下),
 
以低壓(不超過6 in Hg 即20 KPa)抽氣幫浦過濾(時間不得超過10分鐘,否則容易破壞細胞降低葉綠素測值)
至玻璃纖維濾紙上,但是不要使用幫埔將濾紙上水樣完全抽干。

以鑷子將濾紙移離開過濾器,將之折疊,含有顆粒物質(zhì)的那面在內(nèi)側(cè),用吸紙輕輕吸取濾紙上過多的水分,
將濾紙放在培養(yǎng)皿(petri dish) 或其他適合的容器內(nèi),若不立即進行萃取,用鋁箔紙將容器包裹以避光,
儲存于-20℃或-70℃的冰箱中,若儲存于冰塊中,2至4小時內(nèi)仍可行,于-20℃的環(huán)境下儲存不得超過31/2星期。

萃取過程中,為方便萃取,將濾紙浸泡在90%丙酮冰箱內(nèi)2小時以上,但不超過24小時,將濾紙移出冰箱,
置于黑暗處回溫。將均質(zhì)機組合好,含水、含丙酮的洗滌瓶準備在側(cè),工作平臺上的光線盡可能調(diào)暗。
將濾紙自容器中取出,剪成小片狀,放入玻璃研磨管內(nèi),以玻棒將之推至研磨管底,加入4 mL 90%丙酮
(丙酮:水= 9:1),以500 rpm研磨1分鐘,將濾紙片研磨成泥,需注意研磨過程不可過熱。

將濾紙泥移入15 m??L具螺旋蓋的離心管,再用6 mL的90%丙酮(丙酮:水= 9:1),清洗附在旋轉(zhuǎn)杵、及管內(nèi)的殘留物,
此清洗液也注入含濾紙泥的離心管內(nèi),蓋上螺旋蓋,震蕩之,將之置于黑暗,直到進行下ㄧ步驟。
研磨下一張濾紙前,用丙酮、用水清洗旋轉(zhuǎn)杵、研磨管及玻棒,為降低試劑級的溶劑使用,
可先用水龍頭水清洗后,再用丙酮潤濕;空白試驗的濾紙留至最后研磨。以675g離心15分鐘或1000g 離心5分鐘。
取其上澄液。
熒光光度計須依賴分光光度計校正,故校正與檢量線的制作不同,而套用的方程式也不一樣


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