本文標(biāo)題："測定由氨基酸-離子材料上進(jìn)行氣液層析"
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比色計測定由氨基酸-離子材料上進(jìn)行氣液層析
蛋白質(zhì)水解物一類的樣品在低pH的情況下通過一個注
射系統(tǒng)被引入，并用泵打到強酸性離子交換樹脂上。具有不
同離子強度和不同pH的緩沖液在一個特殊的梯度腔中混合，
使混合后的緩沖液的pH和離子強度逐漸增加，然后用一個泵
將這種緩沖液通過柱進(jìn)行洗脫。從柱上下來的洗脫液和茍三
酮顏色試劑混合，同時也引人氮氣形成一個有規(guī)律的氣泡，以
防止被洗脫的化合物過分的混合。然后混合物在油浴上加熱
顯色，通過一個冷卻的螺旋管，再通過一個調(diào)置在570毫微米
的比色計測定由氨基酸和荀三酮反應(yīng)所產(chǎn)生的藍(lán)顏色。比色
計和一個雙道記錄儀相聯(lián)，記錄了從柱上下來的洗脫液的連
續(xù)圖形。脯氨酸和經(jīng)基脯氨酸與荀三酮產(chǎn)生黃顏色，因此洗
脫液經(jīng)過第二個調(diào)置在440毫微米的比色計來測定這二種氨
基酸的量，結(jié)果被記錄在記錄儀上。很多系統(tǒng)使用二根柱，第
二根柱是堿性陰離子交換樹脂，用于分離堿性氨基酸和氨。
改良過的纖維素對于大分子(如蛋白質(zhì)和核蛋白)的離子
交換分離也是特別有用的。這些大分子因為它們不能滲人到
交聯(lián)的結(jié)構(gòu)中，因此不能在一般的樹脂上被分離。但是，纖維
素是纖維狀的，功能基團(tuán)主要都在表面，對于大分子的交換十
分有效。狡甲基纖維素(CM一纖維素，其CH2OH被CH2OCFI2
COO一基團(tuán)所取代)是一種十分有用的陽離子交換劑，二乙氨
乙基纖維素(DEAE一纖維素)同樣也是一種很有用的陰離子
交換劑。最近，已廣泛地使用了在離子交換材料上進(jìn)行的氣
液層析。
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